細胞增殖檢測是通過量化細胞分裂、生長狀態,開展基礎生物學、藥物篩選、腫瘤研究的核心實驗技術,主流方法及核心信息如下:
一、常用檢測方法及原理
直接計數法
通過血細胞計數板或自動細胞計數儀直接統計細胞數量,配合臺盼藍染色區分活/死細胞,操作簡單成本低,適合初步快速篩查。
代謝活性法
以CCK-8、MTT為代表,利用活細胞線粒體脫氫酶還原顯色底物,通過吸光度間接反映活細胞數量。其中CCK-8試劑毒性低、無需換液,是目前高通量篩選的方法,MTT因操作繁瑣已逐步被替代。
DNA合成標記法
以EdU、BrdU為代表,將胸腺嘧啶類似物摻入新合成的DNA鏈,精準定位S期增殖細胞。EdU無需DNA變性,操作更簡便,適配組織切片和活細胞成像。
其他特色方法
流式細胞術(PI染色):通過DNA含量分析細胞周期分布,適合高通量周期分析。
CFSE染色:熒光染料隨細胞分裂逐代遞減,可追蹤多代細胞分裂次數,多用于免疫細胞活化研究。
ATP檢測:靈敏度高,*低可檢測10個細胞,適配3D細胞培養等低樣本量場景。
二、方法選擇核心要點
高通量藥物初篩:優先選CCK-8法,適配96孔板批量檢測。
精準DNA復制定位:選EdU標記法,結果更精準且操作簡便。
免疫細胞分裂追蹤:選CFSE染色法,可動態觀測多代增殖過程。
低樣本量/3D培養:選ATP檢測法,靈敏度和線性范圍優勢顯著。